大家好！今天 普拉特泽生物带大家学习的是细胞划痕实验的常见问题回答。 细胞划痕实验是观察掌握细胞迁移实验过程中细胞活动的重要实验方法， 普拉特泽生物——细胞实验平台操作各类细胞的划痕实验上百例，专业代做细胞划痕实验和各种细胞实验，对大家提出的各种关于细胞划痕实验的问题都一一做出了回答，希望能对迷茫的你起到一些帮助~

        问题一：细胞划痕实验为什么这么重要？

        答：因为细胞划痕实验是观察细胞迁移活动的重要技术手段，而且简单快捷、经济实惠（划重点！！！）。细胞迁移参与到很多的如免疫、炎症、肿瘤转移、损伤修复、胚胎发育等生理和病理的活动中，有重要的临床研究意义。

        问题二：细胞划痕实验为什么一般选择6孔板？

        答：因为6孔板大小适中，可保证有相当距离的平直划痕，便于观察;当然若是需要高通量初筛时，也可以用12或者24孔板。

        问题三：为什么细胞接种密度要求过夜100%融合？

        答：如果过夜后细胞=没有100%融合，虽然可以适当延长培养时间，但因细胞密度已经很大，所以细胞状态会逐渐变差，后续细胞可能不迁移而是凋亡。

        问题四：怎样避免细胞增殖对细胞迁移实验造成的假阳性结果？

        答：操作如下

        1、使用无血清或低血清培养基(<2%)可降低细胞增殖对实验结果的影响

        2、一般认为24h为细胞的一个周期，在选取合适的时间点(6，12，24h)检测划痕宽度时，最好不要超过细胞一个周期的时间

        3、如果要单纯考虑细胞迁移，可以先用丝裂霉素(1ug/ml)处理1h，抑制细胞的分裂。

        问题五：结果怎样拍照？

        答：按照6孔板背后画线的垂直方向划痕，可以形成若干交叉点，划痕一次与5条定位线相交，就有10个可固定监测点，以解决了前后观察时位置不固定的问题。

        问题六：细胞不迁移怎么回事？

        答：避开细胞状态的影响，需要考虑细胞自身的迁移能力，并非所有细胞都适合划痕实验，以乳腺癌为例，乳腺癌细胞MCF-7几乎很难迁移，而MDA-MB-231具有很强迁移性。

        问题七：结果统计中，细胞计数和统计面积那个好用？

        答：根据细胞划痕实验的实验结果选择。如果细胞迁移轮廊比较清晰，并且迁移数量不多，我们可以选择细胞计数；但如果细胞数比较多，连片生长，那么统计面积比细胞计数的方式更简便且客观。

        问题八：细胞划痕技术有什么不足吗？

        答：细胞划痕实验的不足主要包括：

        1、适用的细胞类型范围小，一是需要迁移强的细胞，而且对无血清的环境有较强的忍受力

        (至少24h)然而很多肿瘤细胞系在无血清培养下，12h细胞凋广就超过50%，因此细胞划痕法对部分肿瘤细胞并不适用。

        2、自身操作的实验误差，如划痕距离不一致等。

        好啦，那关于细胞划痕实验的各种问题咱们的计数就暂时先回答到这里啦，如果您还有更多问题需要补充的话可以留言给我们，技术会及时给到回复与解答的。

        当然如果您有细胞划痕和各类 细胞实验外包与代做的需求，请一定要认准普拉特泽生物！我们下期见~